※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。
序文
ISO (国際標準化機構) は、各国の標準化団体 (ISO メンバー団体) の世界的な連合です。国際規格の作成作業は、通常、ISO 技術委員会を通じて行われます。技術委員会が設立された主題に関心のある各会員団体は、その委員会に代表される権利を有します。 ISOと連携して、政府および非政府の国際機関もこの作業に参加しています。 ISO は、電気技術の標準化に関するすべての問題について、国際電気標準会議 (IEC) と緊密に協力しています。
技術委員会によって採択されたドラフト国際規格は、投票のためにメンバー団体に配布されます。国際規格として発行するには、投票するメンバー団体の少なくとも 75% による承認が必要です。
国際規格 ISO 8128-1 は、技術委員会 ISO/TC 34, 農業用食品、小委員会 SC 3, 果物および野菜製品によって作成されました。
ISO 8128 は、以下の部分で構成されており、一般的なタイトルは「アップル ジュース、アップル ジュース濃縮物、およびアップル ジュースを含む飲料 - パツリン含有量の測定」です。
- ・Part 1部：高速液体クロマトグラフィーを用いた方法
- ・Part 2部：薄層クロマトグラフィーを用いた方法
ISO 8128 のこの部分の附属書 A は、情報提供のみを目的としています。
1 スコープ
ISO 8128 のこのパートでは、高速液体クロマトグラフィーを使用してリンゴ ジュース、リンゴ ジュース濃縮液、およびリンゴ ジュースを含む飲料のパツリン含有量を測定する方法を指定しています。
この方法の検出限界は、すぐに飲めるリンゴジュース 5 ml に基づいて 10 μg/l です。
注記 1 ISO 8128-2 は、薄層クロマトグラフィーを使用する方法を指定しています。
3 試薬
認定された分析グレードの試薬と HPLC グレードの水のみを使用してください。
3.1 溶剤 、酢酸エチル。
3.2 移動相 、アセトニトリル、10 % ( v/v ) 溶液。
3.3 抽出液 14 g/l 無水炭酸ナトリウム水溶液。
3.4 酢酸緩衝液 、pH
16.4 ml の希酢酸 [ c (CH 3 COOH) = 0.2 mol/l] と 3.6 ml の酢酸ナトリウム [ c (CH 3 COONa) = 0.2 mol/l] を混合します。
3.5 酢酸 、氷。
3.6 パツリン標準液 （C7H6O4） 。
3.6.1 準備
100 ml の 1 印のメスフラスコにパツリン 10.0 mg を 0.1 mg 単位で量り、酢酸緩衝液 (3.4) に溶解する。酢酸緩衝液で目印まで作ります。
この溶液 10.0 mL を別の 100 mL の 1 印メスフラスコにピペットで取り、酢酸緩衝液で印まで補充します。
この標準液のパツリン含有量は約 10 μg/ml です。
光路長 10 mm の石英セルを使用して、適切な分光計でこの標準溶液の 276 nm での吸光度を測定します。
注記 2標準溶液の調製とその純度の管理は、参考文献 [3] に基づいています。
3.6.2濃度の計算
次の式を使用して、パツリン溶液 (3.6.1) の濃度ρpsを 1 ミリリットルあたりのマイクログラムで表して計算します。
どこ
| A | はパツリン標準液の吸光度。 |
| A276A | は、吸収スペクトルの最大値 (276 nm) におけるパツリン溶液の分子吸光度です (注 3 を参照) |
| rM | パツリンの相対分子量です。 |
| C | は装置定数 (通常は 1) です。 |
注 3 276 nm でエタノール中で測定されたパツリンの分子吸光係数は 14 600 に等しい。
附属書 A
参考文献
| [1] | ISO 5725:1986, 試験方法の精度 — 試験所間試験による標準試験方法の再現性と再現性の決定。 |
| [2] | ISO 8128-2:1993, リンゴジュース、リンゴジュース濃縮物およびリンゴジュースを含む飲料 — パツリン含有量の測定 — ２：薄層クロマトグラフィーによる方法。 |
| [3] | 公式分析法、第 12 巻、ワシントン DC: AOAC, 1975 年、p. 46 |
| [4] | Kubacki 、SJ およびGoszcz 、H. IUPAC アップル ジュース中のパツリンの測定のための HPLC 法の共同研究。 J.Pure Appt. Chem ., 60 (6): 871-876 (1988) |
| [5] | T anner , H. およびZanier , C. フルーツ ジュースおよび濃縮物における新しい Patulin 測定について。スイス。 Z. Obst Weinbau 、 112: 656-662 (1976) |
| [6] | T anner , H. and Zanier , C. パツリンの公式測定法。 Mid. Territories Labsm. Hyg ., 75: 506-513 (1984) |
| [7] | ポーランド、AE等。一部のマイコトキシンの物理化学的データ。 Ｊ．Ｐｕｒｅ Ａｐｐｌ． Chem., 54: 2219-2284 (1982) |
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
International Standard ISO 8128-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Agricultural food products, Sub-Committee SC 3, Fruit and vegetable products.
ISO 8128consists of the following parts, under the general title Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice — Determination of patulin content:
- -Part 1: Method using high-performance liquid chromatography
- -Part 2: Method using thin-layer chromatography
Annex A of this part of ISO 8128 is for information only.
1 Scope
This part of ISO 8128 specifies a method using high performance liquid chromatography for the determination of the patulin content of apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice.
The limit of detection of the method is 10 μg/l, based on 5 ml of ready-to-drink apple juice.
NOTE 1 ISO 8128-2 specifies a method using thin-layer chromatography.
3 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade, and water of HPLC grade.
3.1 Solvent , ethyl acetate.
3.2 Mobile phase , acetonitrile, 10 % (V/V) solution.
3.3 Extraction solution , 14 g/l aqueous solution of anhydrous sodium carbonate.
3.4 Acetate buffer , pH 4.
Mix 16,4 ml of dilute acetic acid [c(CH3COOH) = 0,2 mol/l] with 3,6 ml of sodium acetate [c(CH3COONa) = 0,2 mol/l].
3.5 Acetic acid , glacial.
3.6 Patulin standard solution (C7H6O4).
3.6.1 Preparation
Weigh, to the nearest 0,1 mg, 10,0 mg of patulin in a 100 ml one-mark volumetric flask and dissolve it in the acetate buffer (3.4). Make up to the mark with the acetate buffer.
Pipette 10,0 ml of this solution into another 100 ml one-mark volumetric flask and make up to the mark with the acetate buffer.
The patulin content of this standard solution is 10 μg/ml approximately.
Measure the absorbance at 276 nm of this standard solution on an appropriate spectrometer using quartz cells of optical path length 10 mm.
NOTE 2 The preparation of the standard solution and the control of its purity are based on reference [3].
3.6.2 Calculation of the concentration
Calculate the concentration ρps, expressed in micrograms per millilitre, of the patulin solution (3.6.1) using the formula
where
| A | is the absorbance of the patulin standard solution; |
| A276 | is the molecular absorbance of the patulin solution at the maximum (276 nm) of the absorption spectrum (see note 3); |
| Mr | is the relative molecular mass of patulin; |
| C | is the apparatus constant (usually 1). |
NOTE 3 The molecular absorbance coefficient of patulin measured in ethanol at 276 nm is equal to 14 600.
Annex A
Bibliography
| [1] | ISO 5725:1986, Precision of test methods — Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests. |
| [2] | ISO 8128-2:1993, Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice — Determination of patulin content — 2: Method using thin-layer chromatography. |
| [3] | Official Methods of Analysis, Vol. 12, Washington DC: AOAC, 1975, p. 463. |
| [4] | Kubacki, S.J. and Goszcz, H. IUPAC Collaborative Study of HPLC methods for the determination of patulin in apple juice. J. Pure Appt. Chem., 60 (6): 871-876 (1988). |
| [5] | Tanner, H. and Zanier, C. Ueber eine neue Patulin Bestimmung in Fruchtsäften und Konzentraten. Schweiz. Z. Obst Weinbau, 112: 656-662 (1976). |
| [6] | Tanner, H. and Zanier, C. Amtliche Methoden zur Bestimmung von Patulin. Mitt. Gebiete Labsm. Hyg., 75: 506-513 (1984). |
| [7] | Pohland, A.E. et al. Physicochemical data for some selected mycotoxins. J. Pure Appl. Chem., 54: 2219-2284 (1982). |