ISO/TS 21569-9:2025 分子バイオマーカー分析のための水平的手法 — 遺伝子組み換え生物および派生産物の検出のための分析法 — Part 9:P35S-nptII DNA 配列検出のためのコンストラクト特異的リアルタイム PCR ベースのスクリーニング法 | ページ 2

※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。

序文

ISO (国際標準化機構) は、国家標準化団体 (ISO メンバー団体) の世界的な連合体です。国際規格の作成作業は通常、ISO 技術委員会を通じて行われます。技術委員会が設立された主題に関心のある各会員団体は、その委員会に代表される権利を有します。政府および非政府の国際機関も ISO と連携してこの作業に参加しています。 ISO は、電気技術の標準化に関するあらゆる事項について、国際電気標準会議 (IEC) と緊密に協力しています。

この文書の開発に使用される手順と、そのさらなる保守を目的とした手順は、ISO/IEC 指令Part 1 部に記載されています。特に、さまざまなタイプの ISO 文書に必要なさまざまな承認基準に注意する必要があります。この文書は、ISO/IEC 指令Part 2 部の編集規則に従って起草されました ( www.iso.org/directives を参照)

ISO は、この文書の実装に特許の使用が含まれる可能性があることに注意を促しています。 ISO は、請求された特許権に関する証拠、有効性、または適用可能性に関していかなる立場もとりません。この文書の発行日の時点で、ISO はこの文書の実装に必要となる可能性のある特許の通知を受け取っていません。ただし、実装者は、これが www.iso.org/patents で入手可能な特許データベースから取得できる最新の情報を表していない可能性があることに注意してください。 ISO は、かかる特許権の一部またはすべてを特定する責任を負わないものとします。

本書で使用されている商号は、ユーザーの便宜のために提供された情報であり、推奨を構成するものではありません。

規格の自主的な性質、適合性評価に関連する ISO 固有の用語と表現の意味、および貿易の技術的障壁 (TBT) における世界貿易機関 (WTO) 原則への ISO の準拠に関する情報については、 www.iso.org/iso/foreword.html を参照してください。

この文書は、技術委員会 ISO/TC 34, 食品、小委員会 SC 16, 分子バイオマーカー分析のための水平的手法によって作成されました。

ISO 21569 シリーズのすべての部品のリストは、ISO の Web サイトでご覧いただけます。

1 スコープ

この文書は、カリフラワー モザイク ウイルス (P35S) の 35S プロモーター領域と大腸菌の Tn5 トランスポゾンのネオマイシン ホスホトランスフェラーゼ遺伝子 ( npt II) の間の DNA 遷移配列を検出する手順を指定します。 P35S- npt II セグメントは、遺伝子組み換え (GM) 植物で頻繁に見られるネオマイシン/カナマイシン抗生物質に対する耐性を与える構築物の一部です。

検出方法はリアルタイム PCR に基づいており、定性的スクリーニングの目的に使用できます。特定の GM 植物 (事象) を同定および定量化するには、追跡分析を実行する必要があります。

この方法は食品から抽出したDNAの解析に応用できます。飼料や種子などの他の製品から抽出された DNA の分析にも適しています。この方法を適用するには、関連するマトリックスから適切な量の増幅可能な DNA を抽出する必要があります。

2 規範的参照

以下の文書は、その内容の一部またはすべてがこの文書の要件を構成する形で本文中で参照されています。日付が記載された参考文献については、引用された版のみが適用されます。日付のない参照については、参照文書の最新版 (修正を含む) が適用されます。

  • ISO 16577, 分子バイオマーカー分析 — 農業および食品生産における分子バイオマーカー分析方法の語彙
  • ISO 21569, 食品 — 遺伝子組み換え生物および派生製品の検出のための分析方法 — 定性的な核酸ベースの方法
  • ISO 21571, 食品 — 遺伝子組み換え生物および派生製品の検出のための分析方法 — 核酸抽出
  • ISO 24276, 食品 — 遺伝子組み換え生物および派生製品の検出のための分析方法 — 一般要件および定義

3 用語と定義

この文書の目的には、ISO 16577 で与えられる用語と定義が適用されます。

ISO と IEC は、標準化に使用する用語データベースを次のアドレスで維持しています。

参考文献

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3ISO 21570, 食品 — 遺伝子組み換え生物およびその派生製品の検出のための分析方法 — 定量的な核酸ベースの方法
4Reiting , R. 食品、飼料および種子中の遺伝子組み換え植物の検出のための、nptII 遺伝子を含む DNA 構築物の検出のためのリアルタイム PCR 法。 J. 命の消費。 2010, 5, 377–390 ページ
5BVL G 30.40-18, 遺伝子組み換え植物のスクリーニングのための P35S- nptII構築物のリアルタイム PCR 検出 - 構築物特異的方法。参照:ドイツ遺伝子工学法 (GenTG) の第 28b 条に基づく分析法の公式コレクションベルリン:ビュート、2019
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7CEN/TS 17329-2, 食品 — 定性的リアルタイム PCR 法の検証に関する一般ガイドライン — Part 2: 共同研究
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9食品および飼料用緊急警報システム (RASFF) 2013年4月22日付タイ産無許可遺伝子組み換え青パパイヤに関する情報告示第2013.0571号
10Uhlig S.、 Frost K.、 Colson B.、 Simon K.、 Mäde D.、 Reiting R.、 Gowik P.、 Grohmann L. 検出確率の数学的統計モデリングに基づく定性 PCR 法の検証。認定されました。クオリティ。アッシュール。 2015, 20, 75–83 ページ
11統合データベース システム (EUginius) に関するヨーロッパの GMO イニシアチブ。 [最終アクセス日 2025-03] から入手可能: www.euginius.eu
12中央ポータルのバイオセーフティ クリアリング ハウス、遺伝子組み換え生物 (LMO) 登録。 [最終アクセス日 2025-03] から利用可能: https://bch.cbd.int/database/lmo-registry/
13米国農務省 - 動植物衛生検査局 (USDA-APHIS)非規制ステータスの決定を求める請願。 [最終アクセス日 2025-03] から入手可能: https://www.aphis.usda.gov/biotechnology/legacy-petition-process/petitions

Foreword

ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.

The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives ).

ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a) patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a) patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at www.iso.org/patents . ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.

Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not constitute an endorsement.

For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to the World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html .

This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 16, Horizontal methods for molecular biomarker analysis.

A list of all parts in the ISO 21569 series can be found on the ISO website.

1 Scope

This document specifies a procedure for the detection of the DNA transition sequence between the 35S promoter region from cauliflower mosaic virus (P35S) and the neomycin-phosphotransferase gene (nptII) from the Tn5 transposon of Escherichia coli. The P35S-nptII segment is part of a construct which confers resistance to neomycin/kanamycin antibiotics frequently found in genetically modified (GM) plants.

The detection method is based on real-time PCR and can be used for qualitative screening purposes. For identification and quantification of a specific GM plant (event) a follow-up analysis has to be carried out.

This method is applicable for the analysis of DNA extracted from foodstuffs. It can also be suitable for the analysis of DNA extracted from other products such as feedstuffs and seeds. The application of this method requires the extraction of an adequate amount of amplifiable DNA from the relevant matrix.

2 Normative references

The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.

  • ISO 16577, Molecular biomarker analysis — Vocabulary for molecular biomarker analytical methods in agriculture and food production
  • ISO 21569, Foodstuffs — Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products — Qualitative nucleic acid based methods
  • ISO 21571, Foodstuffs — Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products — Nucleic acid extraction
  • ISO 24276, Foodstuffs — Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products — General requirements and definitions

3 Terms and definitions

For the purposes of this document, the terms and definitions given in ISO 16577 apply.

ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:

Bibliography

1Laube, I., Hird, H., Brodmann, P., Ullmann, S., Schöne-Michling, M., Chisholm, L., Broll, H. Development of primer and probe sets for the detection of plant species in honey. Food Chem. 2010, 118, pp. 979–986
2Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach §64 LFGB, L 40.00-14: Untersuchung von Lebensmitteln - Präparation von DNA aus Honig, 2012
3ISO 21570, Foodstuffs — Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products — Quantitative nucleic acid based methods
4Reiting, R. Real-time PCR method for the detection of DNA constructs with the nptII gene for the detection of genetically modified plants in food, feed and seed. J. Verbr. Lebensm. 2010, 5, pp. 377–390
5BVL G 30.40-18, Real-time PCR-Nachweis des P35S-nptII-Konstrukts zum Screening auf gentechnisch veränderte Pflanzen - Konstrukt-spezifisches Verfahren [Real-time PCR detection of the P35S-nptII construct for screening of genetically modified plants — Construct-specific method]. In: Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 28b GenTG [Official collection of analytical methods according to article 28b of the German Genetic Engineering Act (GenTG)]. Berlin: Beuth, 2019
6ISO 5725-2, Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results — basic method for the determination of the repeatability and reproducibility of a standard measurement method
7CEN/TS 17329-2, Foodstuffs — General guidelines for the validation of qualitative real-time PCR methods — Part 2: Collaborative study
8Federal Office of Consumer Protection and Food Safety. Guidelines for the interlaboratory validation of qualitative real-time PCR methods. Bundesamt für Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherheit (BVL), 2016 (in German). Available from [last accessed 2025-03]: https://www.bvl.bund.de/SharedDocs/Downloads/07_Untersuchungen/Leitlinien%20zur%20Ringversuchs%20Validierung.pdf?__blob=publicationFile&v=5
9Rapid Alert System for Food and Feed (RASFF). Information Notification No. 2013.0571 on unauthorised genetically modified green papaya from Thailand of 22 April, 2013
10Uhlig S., Frost K., Colson B., Simon K., Mäde D., Reiting R., Gowik P., Grohmann L. Validation of qualitative PCR methods on the basis of mathematical-statistical modelling of the probability of detection. Accred. Qual. Assur. 2015, 20, pp. 75–83
11European GMO initiative for a unified database system (EUginius). Available from [last accessed 2025-03]: www.euginius.eu
12Central Portal Biosafety Clearing-House, Living Modified Organism (LMO) Register. Available from [last accessed 2025-03]: https://bch.cbd.int/database/lmo-registry/
13United States Department of Agriculture – Animal and Plant Health Inspection Service (USDA-APHIS). Petitions for Determination of Nonregulated Status. Available from [last accessed 2025-03]: https://www.aphis.usda.gov/biotechnology/legacy-petition-process/petitions