※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。
序文
ISO (国際標準化機構) は、国家標準化団体 (ISO メンバー団体) の世界的な連合体です。国際規格の作成作業は通常、ISO 技術委員会を通じて行われます。技術委員会が設立された主題に関心のある各会員団体は、その委員会に代表される権利を有します。政府および非政府の国際機関も ISO と連携してこの作業に参加しています。 ISO は、電気技術の標準化に関するあらゆる事項について、国際電気標準会議 (IEC) と緊密に協力しています。
国際規格は、ISO/IEC 指令Part に規定されている規則に従って草案されています。
技術委員会の主な任務は、国際規格を作成することです。技術委員会によって採択された国際規格草案は、投票のために加盟団体に回覧されます。国際規格として発行するには、投票を行った加盟団体の少なくとも 75% による承認が必要です。
他の状況、特にそのような文書が市場で緊急に必要とされている場合、技術委員会は他の種類の文書を発行することを決定する場合があります。
- ISO 公開仕様書 (ISO/PAS) は、ISO 作業グループ内の技術専門家間の合意を表し、投票を行った親委員会のメンバーの 50% 以上によって承認された場合に出版が認められます。
- ISO 技術仕様 (ISO/TS) は技術委員会のメンバー間の合意を表し、投票を行った委員会メンバーの 2/3 によって承認された場合に発行が認められます。
ISO/PAS または ISO/TS は 3 年後に再検討され、さらに 3 年間承認されるか、改訂されて国際規格となるか、または撤回されるかが決定されます。 ISO/PAS または ISO/TS が確認された場合は、さらに 3 年後に再度審査され、その時点で国際規格に変換するか、撤回する必要があります。
この文書の要素の一部が特許権の対象となる可能性があることに注意してください。 ISO は、そのような特許権の一部またはすべてを特定する責任を負わないものとします。
ISO/TS 29843-1 は、技術委員会 ISO/TC 190, 土壌品質、小委員会 SC 4, 生物学的方法によって作成されました。
ISO/TS 29843 は、一般タイトル「土壌品質 - 土壌微生物多様性の決定」の下に、次の部分で構成されています。
- Part 1: リン脂質脂肪酸分析 (PLFA) およびリン脂質エーテル脂質 (PLEL) 分析による方法
- Part 2:「簡易PLFA抽出法」を用いたリン脂質脂肪酸分析(PLFA)による方法
導入
リン脂質はすべての生細胞の膜の必須成分であり、その脂肪酸 (PLFA: リン脂質脂肪酸) またはエーテル結合イソプレノイド側鎖 (PLEL: リン脂質エーテル脂質) により、複雑な微生物群集内の分類学的区別が可能になります (参考文献 [5] および[7])。このアプローチは現在、土壌生態学で十分に確立されており、微生物の多様性を決定するための表現型、したがって遺伝子型(分子遺伝学的)アプローチを補完するツールとして機能します。
土壌脂肪酸の測定にはさまざまな方法が利用可能です。これらの方法論は、適用するとさまざまなレベルの複雑さを示し、土壌微生物群集の記述においてさまざまなレベルの解像度を提供します。
総PLFAとPLELの測定は、土壌の生存可能なバイオマス、つまり生物圏の3つのドメインすべての微生物(細菌、真菌、古細菌)の定量的尺度を提供します。生きている微生物は、リン脂質を含む無傷の膜を持っています。細胞酵素は細胞死後数分または数時間以内に加水分解してリン酸基を放出します (参考文献 [6])
分類学的記述とは別に、PLFA 技術により微生物コンソーシアム内の生理学的変化を決定することができます。例えば、グラム陰性菌では環境ストレスに応答してモノエン性 PLFA 16:1 ω 7c および 18:1 ω 7c がシクロプロピル脂肪酸 cy17:0 および cy19:0 に変換されます (参考文献 [2])
ISO/TS 29843 のこの部分に記載されている方法以外にも、PLFA を決定するための他の方法が利用可能です (参考文献 [3] および [6])これらの方法では、細菌および真菌の PLFA のみを推定できます。ヒドロキシ置換脂肪酸 (PLOH)、非エステル結合 (NEL) 脂肪酸、および PLEL の測定はできません。
1 スコープ
ISO/TS 29843 のこの部分では、土壌からのリン脂質脂肪酸 (PLFA) とリン脂質エーテル脂質 (PLEL) の両方の抽出および測定のための拡張方法を指定しています。
ISO/TS 29843-2 では、土壌から PLFA のみを抽出する簡単な方法が規定されています。
2 規範的参照
この文書を適用するためには、以下の参照文書が不可欠です。日付が記載された参考文献については、引用された版のみが適用されます。日付のない参照については、参照文書の最新版 (修正を含む) が適用されます。
- ISO 10381-6, 土壌品質 - サンプリング - Part 6: 実験室における微生物プロセス、バイオマスおよび多様性の評価のための、好気条件下での土壌の収集、取り扱い、保管に関するガイダンス
参考文献
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| 9 | B lig 、EG および D yer 、WJ (1959) 総脂質の抽出および精製のための迅速な方法。できる。 J.Biochem.物理学、 37, 911-917 ページ |
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
In other circumstances, particularly when there is an urgent market requirement for such documents, a technical committee may decide to publish other types of document:
- an ISO Publicly Available Specification (ISO/PAS) represents an agreement between technical experts in an ISO working group and is accepted for publication if it is approved by more than 50 % of the members of the parent committee casting a vote;
- an ISO Technical Specification (ISO/TS) represents an agreement between the members of a technical committee and is accepted for publication if it is approved by 2/3 of the members of the committee casting a vote.
An ISO/PAS or ISO/TS is reviewed after three years in order to decide whether it will be confirmed for a further three years, revised to become an International Standard, or withdrawn. If the ISO/PAS or ISO/TS is confirmed, it is reviewed again after a further three years, at which time it must either be transformed into an International Standard or be withdrawn.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO/TS 29843-1 was prepared by Technical Committee ISO/TC 190, Soil quality, Subcommittee SC 4, Biological methods.
ISO/TS 29843 consists of the following parts, under the general title Soil quality — Determination of soil microbial diversity:
- Part 1: Method by phospholipid fatty acid analysis (PLFA) and phospholipid ether lipids (PLEL) analysis
- Part 2: Method by phospholipid fatty acid analysis (PLFA) using the “simple PLFA extraction method”
Introduction
Phospholipids are essential components of membranes of all living cells, and their fatty acid (PLFA: phospholipid fatty acids) or ether-linked isoprenoid side chains (PLEL: phospholipid ether lipid) allow for taxonomic differentiation within complex microbial communities (References [5] and [7]). This approach is now well established in soil ecology and serves as a phenotypic and thus complementary tool to genotypic (molecular genetic) approaches for determining microbial diversity.
Different methodologies for determination of soil fatty acids are available. These methodologies present different levels of complexity when applied and provide different levels of resolution in the description of soil microbial communities.
The determination of total PLFA and PLEL provides a quantitative measure of the viable biomass of soil: microorganisms of all three domains of the biosphere (bacteria, fungi and archaebacteria). Viable microbes have an intact membrane, which contains phospholipids. Cellular enzymes hydrolyze and release the phosphate group within minutes or hours following cell death (Reference [6]).
Apart from taxonomic descriptions, the PLFA technique enables the determination of physiological changes within microbial consortia. For instance, the monoenic PLFA 16:1ω7c and 18:1 ω7c are increasingly converted to the cyclopropyl fatty acids cy17:0 and cy19:0 in Gram-negative bacteria in response to environmental stress (Reference [2]).
Besides the method described in this part of ISO/TS 29843, other methods for the determination of PLFA are available (References [3] and [6]). With these methods, only bacterial and fungal PLFA can be estimated; the determination of hydroxy-substituted fatty acids (PLOH), non-ester-linked (NEL) fatty acids and PLEL is not possible.
1 Scope
This part of ISO/TS 29843 specifies an extended method for the extraction and determination of both phospholipid fatty acids (PLFA) and phospholipid ether lipids (PLEL) from soils.
ISO/TS 29843-2 specifies a simple method for the extraction of only PLFA from soils.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
- ISO 10381-6, Soil quality — Sampling — Part 6: Guidance on the collection, handling and storage of soil under aerobic conditions for the assessment of microbiological processes, biomass and diversity in the laboratory
Bibliography
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| 2 | Findlay, R.H., Trexler, M.B., Guckert, J.B. and White, D.C. (1990) Laboratory study of disturbance in marine sediments: response of a microbial community. Mar Ecol - Prog Ser, 62 , pp. 121-133 |
| 3 | Frostegaard, A., Tunlid, A. and Baath, E. (1991) Microbial biomass measured as total lipid phosphate in soils of different organic content. J. Microbiol. Methods, 14, pp. 151-163 |
| 4 | Gattinger, A., Ruser, R., Schloter, M. and Munch, J.C. (2002) Microbial community structure varies in different soil zones of a potato field. Journal of Plant Nutrition and Soil Science, 165 , pp. 421-428 |
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