※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。
1 スコープ
この文書は、遺伝子組み換え酵母菌株Arxula adeninivoransを用いたレポーター遺伝子アッセイによる、水および廃水のエストロゲン様潜在性の測定方法を規定しています。このレポーター遺伝子アッセイは、ヒト エストロゲン受容体アルファの活性化に基づいています。
Arxula adeninivorans は非常に丈夫で耐塩性と温度に優れた試験生物であり、特に高塩分 (導電率 70 mS/cm まで) のサンプルの分析に適しています。試験微生物は、塩化ナトリウム含有量が 20% までの培地で培養できます。
この方法は以下に適用できます。
- 淡水;
- 廃水。
- 海水。
- 汽水;
- 水性抽出物および浸出液。
- 沈殿物の溶出液（淡水）。
- 間隙水。
- 単一物質または化学混合物の水溶液。
- 水を飲んでいる。
水サンプルの直接分析に対するこのメソッドの定量限界 (LOQ) は、17 β -エストラジオール当量 (EEQ) が 1.5 ng/l ～ 3 ng/l の間です。この試験のダイナミック レンジの上限閾値は、17 β -エストラジオール当量 (EEQ) 25 ng/l ～ 40 ng/l です。この閾値を超えるエストロゲン作用を示すサンプルは、有効な定量のために希釈する必要があります。水サンプルのエストロゲン潜在力が所定の LOQ を下回る場合、水サンプルの抽出と事前濃縮が必要になる可能性があります。
この文書の検証のための国際研究機関間試験が実施されました。結果は付録 F にまとめられています。
注 水サンプルの抽出と事前濃縮が必要になる場合があります。
1 Scope
This document specifies a method for the determination of the estrogenic potential of water and waste water by means of a reporter gene assay with a genetically modified yeast strain Arxula adeninivorans. This reporter gene assay is based on the activation of the human estrogen receptor alpha.
Arxula adeninivorans is a highly robust and salt- and temperature-tolerant test organism and is especially suitable for the analysis of samples with high salinity (conductivity up to 70 mS/cm). The test organism can be cultivated in medium with sodium chloride content up to 20 %.
This method is applicable to:
- fresh water;
- waste water;
- sea water;
- brackish water;
- aqueous extracts and leachates;
- eluates of sediments (fresh water);
- pore water;
- aqueous solutions of single substances or of chemical mixtures;
- drinking water.
The limit of quantification (LOQ) of this method for the direct analysis of water samples is between 1,5 ng/l and 3 ng/l 17β-estradiol equivalents (EEQ). The upper threshold of the dynamic range for this test is between 25 ng/l and 40 ng/l 17β-estradiol equivalents (EEQ). Samples showing estrogenic potencies above this threshold have to be diluted for a valid quantification. Extraction and pre-concentration of water samples can prove necessary, if their estrogenic potential is below the given LOQ.
An international interlaboratory trial for the validation of this document has been carried out. The results are summarized in Annex F.
NOTE Extraction and pre-concentration of water samples can prove necessary.