JIS K 0950:1988 プラスチック製滅菌シャーレ

                                       日本工業規格(日本産業規格)                             JIS
                                                                             K 0950-1988

プラスチック製滅菌シャーレ

Sterilized Plastic Petri Dishes

1. 適用範囲 この規格は,バイオテクノロジー関連分野において,組織培養,細胞培養,微生物培養に
用いるプラスチック製滅菌シャーレのうち使い捨てのものについて規定する。
    備考 この規格の中で [{}] を付けて示してある単位及び数値は,従来単位によるものであって,参
          考として併記したものである。
  引用規格 : 
    JIS K 0114 ガスクロマトグラフ分析のための通則
    JIS K 0211 分析化学用語(基礎部門)
    JIS K 0512 水素
    JIS K 1107 高純度窒素
    JIS K 8101 エタノール (99.5)[エチルアルコール (99.5)](試薬)
    JIS Z 9031 ランダム抜取方法
2. 用語の意味 この規格に用いる用語の意味は,JIS K 0114(ガスクロマトグラフ分析のための通則)
及びJIS K 0211[分析化学用語(基礎部門)]によるほか,次による。
(1) 滅菌 対象物中のすべての微生物を殺滅又は除去すること。
(2) 無菌 増殖能力のある微生物,特に細菌,真菌類が存在しない状態。
(3) 無菌生産 無菌状態方式で生産すること。
(4) ガンマ線滅菌法 放射性同位元素を含む線源からのガンマ線照射によって行う滅菌。
(5) エチレンオキシド滅菌法 エチレンオキシドを含むガスによって行う滅菌。
3. 種類
(1) 滅菌製品
  (a) ガンマ線滅菌法によるもの。
  (b) エチレンオキシド滅菌法によるもの。
(2) 無菌生産製品
4. 品質
(1) 材質 プラスチック
(2) 外観 透明性で,肉周りが均一で,傷,ひびなどがなく,かつ,滑らかなこと。
(3) 耐熱性 6.1耐熱性試験方法で変化が認められないこと。
(4) 無菌性 6.2無菌性試験方法で試験したとき無菌であること。

――――― [JIS K 0950 pdf 1] ―――――

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K 0950-1988
(5) 残留エチレンオキシド 細胞の性質を変化させないこと(1)。
    注(1) 使用目的により残留エチレンオキシドの許容値が変わるので,その値は受渡当事者間の協定に
          よるものとし,試験方法は6.3に従って行う。
5. 形状及び寸法
5.1   形状 丸形でふたをもつ図1のもの。
                                          図1 形 状
5.2   寸法 表による。
                                           表寸法 (2)
                                                             単位mm
                            記号    ふたの最大外形 (A)  全体の高さ (B)
                                                              4
                                                             +
                             40           40±4            10 0
                             60           60±4            15±2
                             90A          90±4            15±2
                                                              3
                                                             +
                            90B           90±4            20 2
                            100          100±5            20±3
                          注(2) 当分の間,受渡当事者間の協定によってよい。
6. 試験方法 試料の採取は,JIS Z 9031(ランダム抜取方法)によって行う。
6.1   耐熱性試験方法 70℃の熱水に10分間浸せきした後取り出し,目視により未試験の試料と比較観察
を行い,変化の有無をみる。
6.2   無菌性試験方法 日本薬局方の無菌試験法に準じる(参考参照)。
6.2.1  培地及びその調製法
(1) 培地の組成(3) 日本薬局方に規定するもの。
    注(3) 調製後の培地は必ず密閉状態に保ち,調製後3週間以上経過したものは用いない。
            なお,無菌試験用チオグリコール酸培地I,ぶどう糖・ペプトン培地には,市販品がある。た
          だしこれを用いるときは毎回性能試験を行わなければならない。
(2) 調製法
  (a) 細菌試験用 日本薬局方の規定による。
  (b) 真菌試験用 日本薬局方の規定による。
6.2.2  操作 試験用シャーレに6.2.1で調製した無菌試験用培地を全体の高さの21程度になるように加え,
シャーレにふたをした後,細菌の場合には3032℃で少なくとも7日間,真菌の場合には2025℃で少な
くとも10日間ふ卵器中で培養する。
6.2.3  判定 日本薬局方の規定による。
6.3   残留エチレンオキシド試験方法(ガスクロマトグラフィー)

――――― [JIS K 0950 pdf 2] ―――――

                                                                                              3
                                                                                    K 0950-1988
6.3.1  概要 試料を細切りし抽出容器に入れ,プロピレンオキシドエタノールを加え振り混ぜ,残留エチ
レンオキシドを抽出,抽出液についてガスクロマトグラフによって定量を行う。
6.3.2  測定装置・器具及び試薬
(1) 測定装置及び器具
  (a) ガスクロマトグラフ ガスクロマトグラフ[水素炎イオン化検出器 (FID) 付き]
  (b) 抽出容器 気密性ガラス容器 容量100ml(4)
    注(4) 例えば図2に示すようなヘッドスペースボトルが用いられる。
                                   図2 ヘッドスペースボトル
(2) 試薬
  (a) エタノール JIS K 8101〔エタノール (99.5) [エチルアルコール (99.5)](試薬)〕に規定のもの。
  (b) エチレンオキシドエタノール溶液 (100 最一                      で液状エチレンオキシド(5)約1gを1mgのけ
      たまではかりとり,全量フラスコ100mlに入れ,エタノールを加えて100mlにする。この溶液10ml
      を全量フラスコ1 000mlにとり,エタノールで1 000mlにする。
  (c) プロピレンオキシドエタノール溶液 (200 最一                       でプロピレンオキシド(6)約2gを1mgのけ
      たまではかりとり,全量フラスコ100mlに入れ,エタノールを加えて100mlにする。この溶液10ml
      を全量フラスコ1 000mlにとり,エタノールで1 000mlにする。
    注(5) エチレンオキシドは沸点10.7℃の低沸点化合物であるから,エチレンオキシドの揮散を防ぐた
          め雰囲気温度を5℃以下に保ち操作を行う。
            なお,爆発限界が広く,また毒性も強いので,取扱いには十分注意する。エチレンオキシド
          エタノール溶液は,市販品のものを用いることもできる。
      (6) プロピレンオキシドの沸点は35℃であるから,低温室で操作することが望ましい。
            なお,爆発限界が広く,また毒性も強いので,取扱いには十分注意する。プロピレンオキシ
          ドエタノール溶液は市販品を用いてもよい。
6.3.3  分析方法
(1) 試料の調製方法 シャーレを包装から取り出し5mm角くらいの大きさに切り,その約5gを1mgのけ
    たまではかりとり,内標準物質として,(3)(b)で作成した検量線の範囲に入るような濃度のプロピレン
    オキシドエタノール溶液 (200 最一              7)50mlを加えた抽出容器に入れ,70℃で少なくとも6時間恒温
    振とう機で振とう後(8),冷蔵庫内(9)に放置する。

――――― [JIS K 0950 pdf 3] ―――――

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K 0950-1988
    注(7) プロピレンオキシドエタノール溶液 (200 最一          ‰     タノールで適宜希釈して用いる。
      (8) 材質,厚さ,残存量によって抽出時間は異なるので,予備実験で抽出が行われているかを確認
          する。
      (9) 検量線の作成の場合と同一温度を保つ。
(2) 分析条件 分析条件は機器によって異なるので,最適となる分析条件を選び定量を行う。
      一例を次に示す。
  分析条件の一例
    カラム用管 内径34mm,長さ3mのガラス又はステンレス鋼管
    カラム充てん剤 酸洗浄した白色けい藻土担体(10)(粒径177250             にポリエチレングリコール20M
    を約20%被覆したもの。
    カラム槽温度 40℃
    試料注入口温度 120℃
    検出器 水素炎イオン化検出器
    キャリヤーガス JIS K 1107(高純度窒素)に規定する特級の窒素で流量40ml/min
    燃料ガス JIS K 0512(水素)に規定する1級の水素で58.8kPa [{0.6kgf/cm2}]
    助燃ガス 空気で98.1kPa [{1.0kgf/cm2}]
    注(10) クロモソルブWなどの名で市販されている。
(3) 操作
  (a) 定量 (1)で調製した抽出容器中の気相部分のガス10.5mlを(2)で最適の条件に設定したガスクロ
      マトグラフに導入し,得られたクロマトグラムからエチレンオキシドのピーク面積とプロピレンオ
      キシドのピーク面積との比を求め,検量線からエチレンオキシド濃度 ( 最一最      ‰     
  (b) 検量線の作成 抽出容器に6.3.2(2)(b)のエチレンオキシドエタノール溶液5mlをとり,プロピレン
      オキシドエタノール溶液を,混合液中のエチレンオキシド (EO) とプロピレンオキシド (PO) の濃
      度比 (EO/PO) が1.0,0.8,0.5,0.2,0.1になるように加えた後,全量が50mlになるようにエタノ
      ールを加える。この抽出容器を70℃,6時間加温し冷蔵庫に放置した後,抽出容器の気相部分のガ
      ス1mlを(2)で最適条件に設定したガスクロマトグラフに導入し,得られたクロマトグラムから横軸
      にエチレンオキシド濃度とプロピレンオキシド濃度比 (EO/PO) とを,縦軸にエチレンオキシドの
      ピーク面積とプロピレンオキシドのピーク面積の比をとって検量線を作成する。
7. 包装 最小包装単位の包装材料には,取扱い中又は輸送中に破れない材質のものを用いる。
8. 表示 容器の外箱に次の事項を表示しなければならない。
(1) 名称及び記号
(2) 材質
(3) 種類及び滅菌法
(4) 製造業者名
(5) ロット番号
(6) 滅菌年月日
(7) その他

――――― [JIS K 0950 pdf 4] ―――――

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                                                                                    K 0950-1988
9. 取扱い上の注意
(1) エチレンオキシド滅菌をしたシャーレを使用する場合は,エチレンオキシドの残存量を減少させるた
    め包装したまま箱から出して2週間ほどそのまま放置して使用することが望ましい。
(2) 培養に使用した容器及び内容物の廃棄は,環境汚染のないよう注意して処理する。

――――― [JIS K 0950 pdf 5] ―――――

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