※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。
序章
In vitro感受性試験は、特に微生物が頻繁に使用される抗菌剤に対して獲得耐性を示す可能性のある種に属していると考えられる場合に、疾患を引き起こす疑いのある微生物に対して実施されます。この検査は、耐性の監視、感受性の疫学的研究、および新規および既存の薬剤の比較においても重要です。
希釈手順は、抗菌剤の最小発育阻止濃度 (MIC) を決定するために使用され、抗真菌感受性試験の参照方法を表します。 MIC 法は、抵抗性調査、研究または登録目的での新しい薬剤の比較試験、ルーチン試験であいまいな結果をもたらす生物の感受性を確立するため、ルーチン試験が信頼できない可能性がある生物を用いた試験、および定量的な結果が必要な場合に使用されます。臨床管理用。希釈試験では、微生物は、一連の寒天プレート (寒天希釈) または抗菌剤の連続希釈を含むブロス (ブロス希釈) で識別可能な増殖を生成する能力についてテストされます。
定義された in vitro試験条件下で、定義された期間内に微生物の目に見えるまたは光学的に測定可能な増殖を減少させる抗菌剤の最低濃度 (mg/l) は、MIC として知られています。 MIC は、抗菌剤に対する生物の感受性に対する臨床医のガイドであり、治療の決定を支援します。使用する方法によって結果が影響を受ける可能性があるため、ラボ内およびラボ間の再現性には注意深い管理と標準化が必要です。培養液の MIC 試験は、真のエンドポイントの 1 倍希釈以内で再現可能であると一般に認められています (つまり、2 倍希釈シリーズの ±1 ウェルまたはチューブ)
培養液の希釈は、段階的に (通常は 2 倍に) 濃度を上げていく抗菌剤溶液を含む同量の培養液を保持する容器に、既知の数の微生物を接種する手法です。
培養液微量希釈は、微量希釈トレイでの培養液希釈試験の性能を示します。
この国際規格に記載されている参照方法は、酵母菌の純粋培養の試験を目的としています。この国際規格のこの部分に記載されている培養液微量希釈法は、臨床検査基準協会 (CLSI) [1]および欧州抗菌薬感受性試験委員会 (EUCAST) [2]によって記載されているものと本質的に同じです。これらの方法は、フルコナゾールの MIC が 2 mg/l まで同一ではないにしても、本質的に同一であることが示されています[3] 。他のさまざまな抗真菌剤との研究が計画されているか、進行中です。新しい抗真菌剤の研究を実施するため、または診断装置によって生成された MIC と比較するための参照方法として、この国際規格を使用することを希望する検査室は、目視検査（CLSI法）または分光光度計（EUCAST法）の使用による。どちらの場合でも、そのオプションの手順の詳細は明示的に従う必要があります。
警告 — この国際規格の使用には、危険な物質、操作、および機器が含まれる場合があります。この国際規格は、その使用に関連するすべての安全問題に対処することを意図していません。適切な安全衛生慣行を確立し、使用前に規制制限の適用可能性を判断することは、この国際規格の使用者の責任です。
Introduction
In vitro susceptibility tests are performed on microorganisms suspected of causing disease, particularly if the organism is thought to belong to a species that may exhibit acquired resistance to frequently used antimicrobial agents. The tests are also important in resistance surveillance, epidemiological studies of susceptibility and in comparisons of new and existing agents.
Dilution procedures are used to determine the minimum inhibitory concentrations (MICs) of antimicrobial agents and represent the reference method for antifungal susceptibility testing. MIC methods are used in resistance surveillance, comparative testing of new agents for research or registration purposes, to establish the susceptibility of organisms that give equivocal results in routine tests, for tests with organisms where routine tests may be unreliable and when a quantitative result is needed for clinical management. In dilution tests, microorganisms are tested for their ability to produce discernible growth on a series of agar plates (agar dilution) or in broth (broth dilution) containing serial dilutions of the antimicrobial agent.
The lowest concentration of an antimicrobial agent (in mg/l) that, under defined in vitro test conditions, reduces visible or optically measurable growth of a microorganism within a defined period of time is known as the MIC. The MIC is a guide for the clinician to the susceptibility of the organism to the antimicrobial agent and aids treatment decisions. Careful control and standardization is required for intra- and inter-laboratory reproducibility, as results may be influenced by the method used. It is generally accepted that broth MIC tests are reproducible to within one doubling dilution of the true end point (i.e. ±1 well or tube in a doubling dilution series).
Broth dilution is a technique in which containers holding identical volumes of broth with antimicrobial agent solutions in incrementally (usually twofold) increasing concentrations are inoculated with a known number of microorganisms.
Broth microdilution denotes the performance of the broth dilution test in microdilution trays.
The reference methods described in this International Standard are intended for the testing of pure cultures of yeast fungi. The broth microdilution methods described in this part of this International Standard are essentially the same as those described by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) [1] and by the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) [2] . These methods have been shown to provide MICs of fluconazole that are essentially the same, if not identical up to 2 mg/l [3] . Studies with various other antifungal agents are planned or under way. The laboratory that wishes to use this International Standard for conducting studies of newer antifungal agents, or as a reference method for comparison to MICs generated by a diagnostic device, should select which of the procedure options to use based upon the choice of MIC reading determined by visual inspection (CLSI method) or by use of a spectrophotometer (EUCAST method). In either case, the procedural details for that option are to be followed explicitly.
WARNING — The use of this International Standard may involve hazardous materials, operations and equipment. This International Standard does not purport to address all of the safety problems associated with its use. It is the responsibility of the user of this International Standard to establish appropriate safety and health practices and determine the applicability of regulatory limitations prior to use.