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※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。
序章
L. ニューモフィラorレジオネラ属の存在。は、特定のオリゴヌクレオチドを用いた DNA 配列の増幅 (PCR) によって示され、定量化されます。検出の特異性は、ターゲット シーケンス固有の蛍光標識プローブを使用することによって保証されます。 DNAアンプリコンの量の増加は、フルオロフォア固有のフィルターを備えた定量的PCRデバイスによってリアルタイムで測定および視覚化できます。
検量線は、定量化の目的で使用されます。ガイドライン、最小要件、およびパフォーマンス特性は、結果が信頼性が高く、異なるラボ間で再現可能であることを保証することを目的としています。
このドキュメントは、DNA 抽出の回収率の決定を指定します。抽出手順のパフォーマンスは完全にはカバーされていません (溶解効率は推定されていません)
警告レジオネラ菌レジオネラ属菌による感染生物の吸入によって引き起こされます。したがって、エアロゾルを生成する能力についてすべての技術を評価することをお勧めします。疑わしい場合は、安全キャビネット内で作業を行ってください。
Introduction
The presence of L. pneumophilaorLegionella spp. in water samples is demonstrated and quantified by amplifying DNA sequences (PCR) with specific oligonucleotides. Specificity of the detection is ensured by using a target sequence specific fluorescent-labelled probe. The increase in the amount of the DNA amplicon can be measured and visualized in real time by a quantitative PCR device with fluorophore specific filters.
A calibration curve is used for quantification purposes. The guidelines, minimum requirements and performance characteristics are intended to guarantee that the results are reliable and reproducible between different laboratories.
This document specifies a determination of the recovery of the DNA extraction. The performance of the extraction procedure is not fully covered (lysis efficiency is not estimated).
WARNINGLegionella spp. shall be handled safely by experienced microbiologists on the open bench in a conventional microbiology laboratory conforming to containment level 2. Infection by Legionella spp. is caused by inhalation of the organism; hence it is advisable to assess all techniques for their ability to produce aerosols. In case of doubt, carry out the work in a safety cabinet.