この規格 プレビューページの目次
※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。
序章
ISO 18363 シリーズは、エステル結合 MCPD およびグリシドールの測定に使用できる国際規格のファミリーです。この導入部では、分析者がどの方法が適用に適しているかを判断できるように、現在公開または提案されている 3 つのドキュメントで指定されている方法について説明します。各メソッドの詳細なアプリケーションは、個々のメソッドの範囲内に含まれています。
ISO 18363-1 は、DGF 標準 C-VI 18 (10) と同等の微分法であり、AOCS 公式法 Cd 29c-13 と同一です。簡単に言えば、エステル誘導体からの 3-MCPD およびグリシドールのアルカリ触媒による迅速な放出に基づいています。その後、グリシドールは誘導された 3-MCPD に変換されます。それは2つの部分で構成されています。最初の部分 (A) では、エステル結合 3-MCPD とエステル結合グリシドールの合計を決定できますが、2 番目の部分 (B) では、エステル結合 3-MCPD のみを決定します。両方のアッセイは、室温で行われるアルカリ触媒加アルコール分解による、エステル結合型からの標的分析物 3-MCPD およびグリシドールの放出に基づいています。パート A では、酸性の塩化ナトリウム溶液を使用して反応を停止し、続いてグリシドールを誘導 3-MCPD に変換します。したがって、パート A では 3-MCPD とグリシドールが区別できなくなります。パート B では、グリシドールが誘導された MCPD に変換されるのを防ぐ酸性の塩化物を含まない塩溶液を添加することによって、反応を停止します。それによって、部分Ｂは、真の３－ＭＣＰＤ含有量の決定を可能にする。最後に、サンプルのグリシドール含有量は、両方のアッセイ (A – B) の差に比例し、グリシドールから 3-MCPD への変換比率が決定されたときに計算できます。 ISO 18363-1 は、精製および未精製の植物油脂中のエステル結合 3-MCPD およびグリシドールの高速測定に適用されます。 ISO 18363-1 は、動物性脂肪および使用済みフライ用油脂にも適用できますが、これらのマトリックスの分析の前に検証研究を実施する必要があります。サンプル内の遊離分析物はすべて結果に含まれますが、文書では遊離分析物と結合分析物を区別することはできません。しかし、出版時点では、精製された植物油脂中のエステル化された分析対象物含有量と同じくらい遊離分析物含有量が高いという証拠は研究で示されていません。原則として、ISO 18363-1 は 2-MCPD の測定が実行可能になるように修正することもできますが、この場合も、この分析対象物の分析の前に検証研究を実施する必要があります。
ISO 18363-2 (提案) は、AOCS 公式メソッド Cd 29b-13 を表します。簡単に言うと、エステル誘導体からの MCPD とグリシドールのゆっくりとしたアルカリ性放出に基づいています。その後、グリシドールは 3-MBPD に変換されます。 ISO 18363-2 は、内部標準の使用が異なる 2 つのサンプル調製で構成されます。両方の調製物は、エステル結合 2-MCPD および 3-MCPD の測定に使用されます。パート A では、エステル結合グリシドールの予備結果が決定されます。サンプル中に存在する 3-MCPD は、サンプル調製によってある程度誘導グリシドールに変換されるため、パート B は、この量の誘導グリシドールを定量するのに役立ちます。アッセイAで同位体標識された遊離MCPD異性体を使用し、パートBで同位体標識されたエステル結合2-MCPDおよび3-MCPDを使用すると、エステル切断の効率を監視できます。アッセイ A と B はどちらも、低温下でのゆっくりとしたアルカリ触媒アルコーリシスによるエステル結合型からの標的分析物 2-MCPD, 3-MCPD, およびグリシドールの放出に基づいています。両方のサンプル前処理において、不安定で揮発性のグリシドールを安定性とクロマトグラフィー性能に関して 3-MCPD に匹敵する特性を示す 3-MBPD に変換するために、酸性の濃縮臭化ナトリウム溶液を添加して反応を停止します。さらに、臭化物イオンの大過剰は、天然に存在する量の塩化物を含むサンプルの場合、グリシドールからの 3-MCPD の望ましくない形成を防ぎます。 ISO 18363-2 は、精製および未精製の植物油脂中のエステル結合 3-MCPD, 2-MCPD, およびグリシドールの測定に適用されます。動物性脂肪および使用済みフライ油および脂肪にも適用されますが、これらのマトリックスの分析の前に検証研究を実施する必要があります。サンプル内の遊離分析物は結果に含まれますが、ドキュメントでは遊離分析物と結合分析物を区別することはできません。しかし、この文書の発行時点では、植物油脂中のエステル化分析物含有量ほど遊離分析物含有量が高いという証拠は研究によって示されていません。
このドキュメントは、AOCS 公式メソッド Cd 29a-13 を表しています。簡単に言えば、それはグリシジルエステルの 3-MBPD エステルへの変換と、エステル誘導体からの MCPD および MBPD のゆっくりとした酸触媒放出に基づいています。このドキュメントは、グリシジルエステルが MBPD モノエステルに変換され、続いて遊離分析物 2-MCPD, 3-MCPD, および 3-MBPD がゆっくりとした酸触媒アルコーリシスによって放出される単一のサンプル調製に基づいています。 3-MBPD は、結合したグリシドールの真の含有量を表します。このドキュメントは、精製および未精製の植物油脂中のエステル結合 2-MCPD, 3-MCPD, およびグリシドールの測定に適用できます。動物性脂肪やフライ用油脂にも適用できますが、これらのマトリックスを分析する前に検証研究を実施する必要があります。このメソッドは、結合 (エステル化) 分析対象物の分析に適していますが、必要に応じて、グリシジル エステルを最初に変換せずにこのドキュメントを実行することもできます。このようなセットアップでは、遊離型と結合型の 2-MCPD および 3-MCPD フォームの両方が結果に含まれ、遊離検体の量は、両方のセットアップで実行された 2 つの測定値の差として計算できます。しかし、この文書の発行時点では、植物油脂中のエステル化分析物含有量ほど遊離分析物含有量が高いという証拠は研究によって示されていません。
Introduction
The ISO 18363 series is a family of International Standards which can be used for the determination of ester-bound MCPD and glycidol. This introduction describes the methods specified in the three documents currently published or proposed so that the analyst can decide which methods are suitable for application. The detailed application of each method is contained within the scope of the individual method.
ISO 18363-1 is a differential method equivalent to the DGF standard C-VI 18 (10) and identical to AOCS Official Method Cd 29c-13. Briefly, it is based on a fast alkaline catalysed release of 3-MCPD and glycidol from the ester derivatives. Glycidol is subsequently converted into induced 3-MCPD. It consists of two parts. The first part (A) allows the determination of the sum of ester-bound 3-MCPD and ester-bound glycidol, whereas the second part (B) determines ester-bound 3-MCPD only. Both assays are based on the release of the target analytes 3-MCPD and glycidol from the ester-bound form by an alkaline catalysed alcoholysis carried out at room temperature. In part A, an acidified sodium chloride solution is used to stop the reaction and subsequently convert the glycidol into induced 3-MCPD. Thus, 3-MCPD and glycidol become indistinguishable in part A. In part B, the reaction stop is achieved by the addition of an acidified chloride-free salt solution which also prevents the conversion of glycidol into induced MCPD. Thereby, part B allows the determination of the genuine 3-MCPD content. Finally, the glycidol content of the sample is proportional to the difference of both assays (A – B) and can be calculated when the transformation ratio from glycidol to 3-MCPD has been determined. ISO 18363-1 is applicable to the fast determination of ester-bound 3-MCPD and glycidol in refined and non-refined vegetable oils and fats. ISO 18363-1 can also apply to animal fats and used frying oils and fats, but a validation study has to be undertaken before the analysis of these matrices. Any free analytes within the sample would be included in the results, but the document does not allow the distinction between free and bound analytes. However, as of publication, research has not shown any evidence of a free analyte content as high as the esterified analyte content in refined vegetable oils and fats. In principle, ISO 18363-1 can also be modified in such a way that the determination of 2-MCPD is feasible, but again, a validation study has to be undertaken before the analysis of this analyte.
ISO 18363-2 (proposed) will represent AOCS Official Method Cd 29b-13. Briefly, it will be based on a slow alkaline release of MCPD and glycidol from the ester derivatives. Glycidol is subsequently converted into 3-MBPD. ISO 18363-2 will consist of two sample preparations that differ in the use of internal standards. Both preparations will be used for the determination of ester-bound 2-MCPD and 3-MCPD. In part A, a preliminary result for ester-bound glycidol will be determined. Because the 3-MCPD present in the sample will be converted to some minor extent into induced glycidol by the sample preparation, part B will serve to quantify this amount of induced glycidol that is subsequently subtracted from the preliminary glycidol result of part A. By the use of isotopically labelled free MCPD isomers in assay A and isotopically labelled ester-bound 2-MCPD and 3-MCPD in part B, the efficiency of ester cleavage will be able to be monitored. Both assays A and B will be based on the release of the target analytes 2-MCPD, 3-MCPD, and glycidol from the ester-bound form by a slow alkaline catalysed alcoholysis in the cold. In both sample preparations, the reaction will be stopped by the addition of an acidified concentrated sodium bromide solution so as to convert the unstable and volatile glycidol into 3-MBPD which shows comparable properties to 3-MCPD with regard to its stability and chromatographic performance. Moreover, the major excess of bromide ions will prevent the undesired formation of 3-MCPD from glycidol in the case of samples which contain naturally occurring amounts of chloride. ISO 18363-2 will be applicable to the determination of ester-bound 3-MCPD, 2-MCPD, and glycidol in refined and unrefined vegetable oils and fats. It will also apply to animal fats and used frying oils and fats, but a validation study will have to be undertaken before the analysis of these matrices. Any free analytes within the sample would be included in the results, but the document will not allow the distinction between free and bound analytes. However, as of publication of this document, research has not shown any evidence of a free analyte content as high as the esterified analyte content in vegetable oils and fats.
This document represents AOCS Official Method Cd 29a-13. Briefly, it is based on the conversion of glycidyl esters into 3-MBPD esters and a slow acid catalysed release of MCPD and MBPD from the ester derivatives. This document is based on a single sample preparation in which glycidyl esters are converted into MBPD monoesters, and subsequently, the free analytes 2-MCPD, 3-MCPD, and 3-MBPD are released by a slow acid catalysed alcoholysis. The 3-MBPD represents the genuine content of bound glycidol. This document can be applied for the determination of ester-bound 2-MCPD, 3-MCPD, and glycidol in refined and non-refined vegetable oils and fats. It can also apply to animal fats and used frying oils and fats, but a validation study has to be undertaken before the analysis of these matrices. The method is suited for the analysis of bound (esterified) analytes, but if required, this document can be also performed without the initial conversion of glycidyl esters. In such a setup, both free and bound 2-MCPD and 3-MCPD forms would be included in the results and the amount of free analytes can be calculated as a difference between two determinations performed in both setups. However, as of publication of this document, research has not shown any evidence of a free analyte content as high as the esterified analyte content in vegetable oils and fats.