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※一部、英文及び仏文を自動翻訳した日本語訳を使用しています。
序章
In vitro 抗菌薬感受性試験は、特に分離株が頻繁に使用される抗菌薬に耐性を示す可能性のある種に属していると考えられる場合に、疾患を引き起こす疑いのある細菌に対して実施されます。この検査は、耐性の監視、感受性の疫学的研究、および新規および既存の薬剤の比較においても重要です。
希釈手順は、抗菌剤感受性試験用の抗菌剤の最小発育阻止濃度 (MIC) を決定するために使用されます。 MIC 法は、抵抗性監視、野生型表現型の定義と識別、新しい病原体の比較試験、ルーチン試験であいまいな結果をもたらす生物の感受性の確立、ルーチン試験が信頼できない可能性のある生物の試験、および定量的な結果が得られる場合に使用されます。臨床管理に必要です。希釈試験では、細菌株は、抗菌剤の段階希釈を含むブロス (ブロス希釈) または一連の寒天プレート (寒天希釈) で目に見える増殖を生成する能力についてテストされます。
定義された in vitro 条件下で、定義された期間内に分離された細菌株の目に見える増殖の出現を防ぐ抗菌剤の最低濃度 (mg/l) は、MIC として知られています。ブロス MIC テストのラボ内およびラボ間の再現性には、慎重な管理と標準化が必要です。品質管理 (QC) 株の MIC は、一般に、支配的な中心値を持つ 3 つの倍加希釈にまたがりますが、4 希釈範囲を持つこともできます。
培養液微量希釈は、微量希釈トレイでの培養液希釈試験の性能を示します。培養液の微量希釈は、現在、抗菌薬感受性試験を実施するために世界的に使用されている最も一般的な方法の 1 つです。
このドキュメントは、ISO 20776-2 の第 2 版です。これは、寒天上で一晩培養することによって容易に増殖し、標準化された微量希釈トレイで十分に増殖する好気性細菌の純粋培養を使用して、標準ブロス微量希釈基準法 (ISO 20776-1) に対して抗菌試験装置を評価するために設計されています。標準化された Mueller-Hinton ブロス (容量 ≤200 μl)試験する抗菌剤に応じて変更する必要がある場合があります。
この改訂された文書で詳述されている定量的 MIC および定性的評価は、標準ブロス微量希釈基準法に対する MIC 値を生成する抗菌試験装置で実行される試験の精度、再現性、および QC を測定します。抗菌寒天ディスクの拡散試験は、この文書には含まれていません。
この文書は、MIC 試験が in vitro アッセイであり、ラボ内およびラボ間のアッセイ変動の影響を受けるという前提を使用して改訂されました。派生試験と参照方法の試験とを比較する場合、結果の解釈ではなく、アッセイ性能の測定のみを適用することが適切です。この理由と、ISO 20776-1 の第 2 版、カテゴリカル アグリーメント (CA) およびそれに関連する用語から解釈カテゴリが削除されたため、米国食品医薬品局 (FDA)、Clinical and Laboratory Standards Institute ( CLSI) M23 文書、およびその他の国際文書は適用されていません。 CA の評価を回避することは、唯一の変更がブレークポイントの変更 (アッセイ自体の外部) である場合に、アッセイのパフォーマンスを自動的に再評価する必要性を減らすのにも役立ちます。
このドキュメントは、発行日以降に開始された新しいパフォーマンス評価に適用されます。この文書の承認日より前に実施された研究は、これらの基準を使用して再設計および/または再分析する必要はありません。これらの基準またはこのドキュメントの受理前に実施された調査は、調査時の標準的な慣行またはガイダンスに従います。
3 回以上の 2 倍希釈による派生テストでは、アッセイのパフォーマンスは、必須一致 (EA) とバイアスを使用して精度を測定し、EA のみを使用して精度を測定するように設計されたツールを使用して評価されます。 1 ～ 3 濃度の派生試験では、標準的な感度と特異度の尺度を使用してアッセイ性能を評価します。
Introduction
In vitro antimicrobial susceptibility tests are performed on bacteria suspected of causing disease, particularly if the isolate is thought to belong to a species that can exhibit resistance to frequently used antimicrobial agents. The tests are also important in resistance surveillance, epidemiological studies of susceptibility and in comparisons of new and existing agents.
Dilution procedures are used to determine the minimum inhibitory concentrations (MICs) of antimicrobial agents for antimicrobial susceptibility testing. MIC methods are used in resistance surveillance, defining and identifying wild type phenotypes, comparative testing of new agents, to establish the susceptibility of organisms that give equivocal results in routine tests, for tests on organisms where routine tests can be unreliable and when a quantitative result is required for clinical management. In dilution tests, bacterial strains are tested for their ability to produce visible growth in broth (broth dilution) containing serial dilutions of the antimicrobial agent or on a series of agar plates (agar dilution).
The lowest concentration of an antimicrobial agent (in mg/l) that, under defined in vitro conditions, prevents the appearance of visible growth of an isolated bacterial strain within a defined period of time, is known as the MIC. Careful control and standardization are required for intra- and interlaboratory reproducibility of broth MIC tests. The MICs of quality control (QC) strains generally span three doubling dilutions with a dominant central value, but can have a four-dilution range.
Broth micro-dilution denotes the performance of the broth dilution test in micro-dilution trays. Broth micro-dilution is now one of the most common methods used globally to perform antimicrobial susceptibility tests.
This document is the second edition of ISO 20776-2. It is designed for the evaluation of antimicrobial test devices against the standard broth micro-dilution reference method (ISO 20776-1) using pure cultures of aerobic bacteria that are easily grown by overnight incubation on agar and grow well in standardized micro-dilution trays containing standardized Mueller-Hinton broth (volume of ≤200 µl), which can need to be modified depending on the antimicrobial agent being tested.
Quantitative MIC and qualitative evaluations detailed in this revised document measure the accuracy, reproducibility and QC of tests performed with antimicrobial test devices that generate MIC values against the standard broth micro-dilution reference method. Antimicrobial agar disc diffusion tests are not included in this document.
This document has been revised using the premise that the MIC test is an in vitro assay, subject to intra- and interlaboratory assay variation. When making the comparison between any derivative test and that of the reference method, it is appropriate to apply measures of assay performance only and not result interpretation. For this reason, and because interpretive categories were removed from the second edition of ISO 20776-1, categorical agreement (CA) and its associated terminology, as described by the U.S. Food and Drug Administration (FDA), the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) M23 document, and other international documents, has not been applied. Avoiding an assessment of CA also assists in reducing the requirement to reassess assay performance automatically when the only change has been a breakpoint change (which is external to the assay itself).
This document applies to new performance evaluations initiated after the publication date; studies conducted prior to the acceptance date of this document should not need to be re-designed and/or re-analysed using these criteria. Studies conducted prior to these standards or acceptance of this document follow standard practice or guidance at the time of the study.
For derivative tests with more than three two-fold dilutions, assay performance is assessed with tools designed to measure accuracy using essential agreement (EA) and bias, and precision using EA only. For derivative tests with 1 to 3 concentrations, assay performance is assessed using standard sensitivity and specificity measures.