JIS B 8701:2017 次亜塩素酸水生成装置 | ページ 4

14
B 8701 : 2017
                                                                  ○
                                                                     交流電源
                                                                  V
                                                                  ○電圧計
                                                                  A
                                                                  ○電流計
                                        陰極電極      陽極電極
                               図B.3−サイクル試験模式図(側面)

――――― [JIS B 8701 pdf 16] ―――――

                                                                                             15
                                                                                   B 8701 : 2017
                                          附属書C
                                          (規定)
                                    殺菌性能試験方法
C.1 試験に用いる細菌
  試験に用いる細菌の種類は,次のものとし,それぞれの細菌について試験を行う。試験に用いる細菌の
菌株は,JIS Z 2801の5.1(試験に用いる細菌)による。
a) 大腸菌(Escherichia coli)
b) 黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)
C.2 試薬,材料,試験器具
  試験に用いる試薬,材料,試験器具などは,JIS Z 2801の5.2(薬品,材料,器具及び装置)によるほか,
チオ硫酸ナトリウム五水和物は,JIS K 8637による。
C.3 器具等の滅菌
  試験に用いる器具等の滅菌は,JIS Z 2801の5.3(殺菌方法)による。
C.4 培地など
  試験に用いる培地などは,次による。
a) 普通ブイヨン培地 普通ブイヨン培地は,JIS Z 2801の5.4 a)(普通ブイヨン培地)による。
b) 標準寒天培地 標準寒天培地は,JIS Z 2801の5.4 c)(標準寒天培地)による。
c) りん酸緩衝生理食塩水 りん酸緩衝生理食塩水は,JIS Z 2801の5.4 g)(りん酸緩衝生理食塩水)によ
    る。
d) 反応停止剤 反応停止剤は,3.0 gのチオ硫酸ナトリウム五水和物を量りとり,精製水100 mLに溶解
    する。反応停止剤は,用時調製する。
C.5 細菌の保存
  試験に用いる細菌の保存はJIS Z 2801の5.5(細菌の保存)による。
C.6 試験操作
  試験に用いる細菌の取扱いは,JIS Z 2801の5.6(試験操作)によるほか,次による。
a) 試験菌の前培養 試験菌の前培養は,JIS Z 2801の5.6 a)(試験菌の前培養)による。
b) 試験菌液の調製 上記a) で前培養した試験菌の菌体1白金耳量を,少量のC.4 a) の普通ブイヨン培
    地に均一に分散させ,顕微鏡による直接観察,その他の適切な方法によって菌数を推定する。この菌
    液をC.4 a) の普通ブイヨン培地を用いて適宜希釈し,菌数が2.0×108 CFU/mL1.0×109 CFU/mLと
    なるように調整し,これを試験菌液とする。試験菌液を直ちに使用しない場合は氷冷(0 ℃)保存し,
    保存後2時間以内に使用する。
c) 試験菌液の接種
  1) 精製水 上記b) の試験菌液0.1 mLをピペットで正確に採取し,滅菌した精製水9.8 mLの入った試

――――― [JIS B 8701 pdf 17] ―――――

16
B 8701 : 2017
      験管に加え,30秒間十分に混合する。C.4 d) の反応停止剤0.1 mLをピペットで正確に採取し,こ
      の試験管に加え,十分に混合し反応を止める。
  2) 次亜塩素酸水 生成装置から採取した次亜塩素酸水9.8 mLをピペットで正確に採取し,試験管に入
      れる。この試験管を2本準備する。上記b) の試験菌液0.1 mLをピペットで正確に採取し,次亜塩
      素酸水9.8 mLの入った試験管にそれぞれ加え,30秒間十分に混合する。C.4 d) の反応停止剤0.1 mL
      をピペットで正確に採取し,これらの試験管に加え,十分に混合し反応を止める。
d) 生菌数の測定 生菌数の測定は,上記c) の試験管から1 mLをピペットで正確に採取し,別の試験管
    のC.4 c) のりん酸緩衝生理食塩水(pH6.8pH7.2)9.0 mLに入れて,十分に混合する。この操作を順
    次繰り返して,10倍希釈系列希釈液を作製する。原液及び各希釈液から,それぞれ1 mLを滅菌済シ
    ャーレ2枚に分注する。これらのシャーレ1枚当たり,46 ℃48 ℃に保温したC.4 b) の標準寒天培
    地15 mL20 mLを加え,よく混合する。シャーレの蓋をして室温で放置し,培地が固まった後,シ
    ャーレを倒置し,培養器中で温度35 ℃±1 ℃で40時間48時間培養する。培養後,コロニーが現れ
    た希釈系列のコロニー数を測定する。いずれの寒天平板にもコロニーの形成が認められない場合は1
    ×100 CFU/mLとし,測定結果は“不検出”とする。
      注記 生菌数の測定方法については,参考文献の [1,2] を参考とするのがよい。
C.7 生菌数の計算
  生菌数の計算は,希釈倍率ごとにシャーレ2枚のコロニー数の平均値を求め,希釈倍率を乗じる。生菌
数は,有効数字3桁目を四捨五入して2桁で表示する。
C.8 試験結果
  試験結果は,次による。
a) 試験成立条件の判定 試験成立条件の判定は,C.6 c) 1) の精製水での生菌数平均値が,2.0×106
    CFU/mL1.0×107 CFU/mLの範囲内とする。
b) 殺菌性能の計算 殺菌性能の計算は,試験が成立した場合について,式(C.1)による。数値は,小数点
    以下2桁目を切り捨て,小数点以下1桁で表示する。
                                X0
                         N  log(   )  (C.1)
                                X1
                      ここに,          N :  殺菌性能
                                       X0 :  精製水での生菌数(CFU/mL)
                                       X1 :  次亜塩素酸水での生菌数(CFU/mL)
参考文献 [1] 衛生試験法・注解(2015) 金原出版株式会社
          [2] 食品衛生検査指針 微生物編(2015) 公益社団法人日本食品衛生協会