JIS K 9101:2014 Ｌ－アラニン（試薬） | ページ 4

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          を共通すり合わせ三角フラスコ200 mlに正確にはかりとり,水100 mlを加える。次に,JIS K
          8913に規定するよう化カリウム2 g及び硫酸(1+1)2 mlを加え,直ちに栓をして穏やかに振
          り混ぜて,暗所に5分間放置する。指示薬としてでんぷん溶液を用い,12.1) で調製した0.1 mol/l
          チオ硫酸ナトリウム溶液で滴定する。この場合,でんぷん溶液は,終点間際で液の色がうすい
          黄になったときに約0.5 mlを加える。終点は,液の青が消える点とする。
            別に,共通すり合わせ三角フラスコ200 mlに水125 ml及びよう化カリウム2 gとをはかりと
          り,硫酸(1+1)2 mlを加え,直ちに栓をして穏やかに振り混ぜて,暗所に5分間放置し,同
          一条件で空試験を行って滴定量を補正する。
  12.3) 計算 ファクターは,次の式によって算出する。
                                m  25 / 250     A
                         f
                            .0003 566 7V1  V2
                      ここに,           f :  0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液のファクター
                                        m :  はかりとったよう素酸カリウムの質量(g)
                                        A :  よう素酸カリウムの純度(質量分率 %)
                                       V1 :  滴定に要した0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液の体積
                                             (ml)
                                       V2 :  空試験に要した0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液の体
                                             積(ml)
                                0.003 566 7 :  0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液1 mlに相当するよう
                                             素酸カリウムの質量を示す換算係数(g/ml)
  13) アンモニウム標準液
  13.1) アンモニウム標準液(NH4 : 1 mg/ml) 次のいずれかのものを用いる。
  13.1.1)   CSSに基づく標準液 6.3 a) 3.1.1) に準じる。
  13.1.2)   CSS以外の認証標準液など 6.3 a) 3.1.2) に準じる。
  13.1.3)   IS K 8116に規定する塩化アンモニウム2.97 gを全量フラスコ1 000 mlにはかりとり,水を加
          えて溶かし,水を標線まで加えて混合する。
  13.2) アンモニウム標準液(NH4 : 0.01 mg/ml) アンモニウム標準液(NH4 : 1 mg/ml)10 mlを全量フ
         ラスコ1 000 mlに正確にはかりとり,水を標線まで加えて混合する。
b) 器具及び装置 主な器具及び装置は,次のとおりとする。
  1) 吸収セル 6.10 b) 1) による。
  2) 共通すり合わせ平底試験管 6.3 c) による。
  3) 沸騰石 液体を沸騰させるとき,突沸を防ぐために入れる多孔質の小片。
  4) 恒温水槽 20 ℃25 ℃に調節できるもの。
  5) 蒸留装置 例を図3に示す。
  6) 分光光度計 6.10 b) 3) による。
c) 操作 操作は,次のとおり行う。
  1) 試料溶液の調製は,蒸留フラスコAに試料0.50 g及び酸化マグネシウム2 gをはかりとり,水約140
      mlを加える。
  2) 比較溶液の調製は,蒸留フラスコAにアンモニウム標準液(NH4 : 0.01 mg/ml)10 ml及び酸化マグ
      ネシウム2 gをとり,水約140 mlを加える。
  3) 空試験溶液は,蒸留フラスコAに酸化マグネシウム2 gをはかりとり,水約140 mlを加える。
  4) 試料溶液,比較溶液及び空試験溶液に沸騰石2,3片を入れる。受器Hに吸収液を入れ,逆流止め

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      Gの先端を浸し,蒸留装置に連結する。加熱蒸留して初留約75 mlをとり,水を加えて100 mlにす
      る(試料溶液から得られた液をX液,比較溶液から得られた液をY液及び空試験溶液から得られた
      液をZ液とする。)。
  5)   液10 ml,Y液10 ml及びZ液10 mlをそれぞれ共通すり合わせ平底試験管にはかりとり,EDTA2Na
      溶液(インドフェノール青法用)1 ml及びナトリウムフェノキシド溶液4 mlを加えてよく振り混ぜ
      る。これらに次亜塩素酸ナトリウム溶液(有効塩素 質量分率約1 %)2.5 mlを加え,さらに水を加
      えて25 mlにし,20 ℃25 ℃の恒温水槽で15分間放置する。
  6)   液及びY液から得られた液は,Z液から得られた液を対照液とし,吸収セルを用いて,分光光度
      計で波長630 nm付近の吸収極大の波長における吸光度を,JIS K 0115の6.(特定波長における吸収
      の測定)によって測定して比較する。
d) 判定 c) によって操作し,次に適合するとき,“アンモニウム(NH4) : 質量分率0.02 %以下(規格値)”
    とする。
      X液から得られた液の吸光度は,Y液から得られた液の吸光度より大きくない。
                                                                             単位 mm
                                                  A :  蒸留フラスコ500 ml
                                                  B :  連結導入管
                                                  C :  すり合わせコックK-16
                                                  D :  注入漏斗
                                                  E :  ケルダール形トラップ球(E' : 小孔)
                                                  F :  球管冷却器300 mm
                                                  G :  逆流止め(約50 ml)
                                                  H :  受器(有栓形メスシリンダー100 ml)
                                                   I : 共通すり合わせ
                                                   J : 共通テーパー球面すり合わせ
                                                  K :  押さえばね
                                                  L :  ヒーター
               LL
                                       図3−蒸留装置の例

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6.13 他のアミノ酸

  他のアミノ酸の試験方法は,次による。
a) 試験用溶液類 試験用溶液類は,次のものを用いる。
      ニンヒドリン・アセトン溶液(発色液) JIS K 8870に規定するニンヒドリン2 gをJIS K 8034に
    規定するアセトンに溶かし,アセトンで100 mlにする。
b) 器具及び装置 主な器具及び装置は,次のとおりとする。
  1) 薄層板 (50 mm200 mm)×200 mmの平滑で均一な厚さのガラス板に,固定相基材を0.2 mm0.3
      mmの均一な厚さに塗布したもの。
        なお,薄層板は,市販の既製品も使用することができる。
  2) 展開容器 例を図4に示す。
  3) マイクロシリンジなど 少量の定容量の測定溶液をはかりとる体積計。
  4) ピストン式ピペット JIS K 0970に規定するもの。
  5) ろ紙 JIS P 3801に規定するもの。
  6) 乾燥器 試験温度に対して±2 ℃以内に調節できるもの。
                                       図4−展開容器の例
c) 分析条件
  1) 固定相基材の種類 薄層クロマトグラフ用シリカゲル
  2) 展開溶媒 JIS K 8810に規定する1-ブタノール100 ml,水40 ml及びJIS K 8355に規定する酢酸20
      mlを混合する。
  3) 展開距離 約10 cm
d) 操作 操作は,次のとおり行う。
  1) 試料溶液の調製は,試料0.20 gを全量フラスコ50 mlにはかりとり,水を加えて溶かし,水を標線
      まで加えて混合する。
  2) 薄層板の下端から約20 mm上の位置を原線とし,原線上の左右両端から少なくとも10 mm離れた
      位置に試料溶液0.005 ml(試料量20 μg)をマイクロシリンジ,ピストン式ピペットなどを用いて
      10 mm以上の間隔で2 mm6 mmの円形状にスポットし,乾燥する。
  3) 展開容器の内壁に沿ってろ紙を巻き,ろ紙を展開溶媒で湿し,更に展開溶媒を約10 mmの深さに入
      れ,展開容器を密閉した後,室温で約1時間放置して展開溶媒の蒸気を飽和させる。

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  4) これに薄層板を器壁に触れないように入れ,容器を密閉し,室温で放置して展開させる。
  5) 展開溶媒の先端が原線から約10 cmの距離まで上昇したとき,薄層板を取り出し,直ちに溶媒の先
      端の位置に印を付けて風乾後,100 ℃で30分間乾燥し,放冷する。これに発色液を噴霧し,80 ℃
      で10分間加熱して発色させ,スポットの位置,数などを調べる。
e) 判定 d) によって操作し,次に適合するとき,“他のアミノ酸 : 試験適合”とする。
      発色液を噴霧した薄層板は,主スポット以外のスポットを認めない。
      注記 移動率(Rf)を求める場合は,次の式よって算出する。
                             a
                         Rf
                             b
                      ここに,         Rf :  移動率
                                        a :  原線からスポットの中心までの距離(mm)
                                        b :  原線から溶媒先端までの距離(mm)
              なお,L-アラニンのRf値は,約0.2である。

7 容器

  容器は,気密容器とする。

8 表示

  容器には,次の事項を表示する。
a) 日本工業規格(日本産業規格)番号
b) 名称 “L-アラニン”及び“試薬”の文字
c) 種類
d) 化学式及び式量
e) 純度
f)  内容量
g) 製造番号
h) 製造業者名又はその略号