JIS K 9045:2012 Ｌ－アスパラギン酸（試薬） | ページ 4

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  10.4) 水を超音波振動装置で十分に脱気を行ったもの。
  10.5) 18 MΩ・cm以上の抵抗率のある水を,窒素を通じた三角フラスコに泡立てないように採取したも
       の。ただし,採水後速やかに用いる。
         注記 脱イオン化された水を用いる場合,脱イオン装置によっては酸素を含む場合がある。
  11) 硫酸(1+1) 水の体積1を冷却してかき混ぜながら,JIS K 8951に規定する硫酸の体積1を徐々
      に加える。
  12) 硫酸(1+15) 水の体積15を冷却してかき混ぜながら,硫酸の体積1を徐々に加える。
  13) 0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液(Na2S2O3・5H2O : 24.82 g/l) 0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶
       液の調製,標定及び計算は,次による。
  13.1) 調製 JIS K 8637に規定するチオ硫酸ナトリウム五水和物26 g及びJIS K 8625に規定する炭酸ナ
        トリウム0.2 gをはかりとり,溶存酸素を除いた水1 000 mlを加えて溶かした後,気密容器に入
        れて保存する。調製後2日間放置したものを用いる。
  13.2) 標定 標定は,認証標準物質1) 又はJIS K 8005に規定する容量分析用標準物質のよう素酸カリウ
        ムを用い,次のとおり行う。
  13.2.1) 認証標準物質1) のよう素酸カリウムを用いる場合は,認証書に定める方法で使用する。
  13.2.2) 容量分析用標準物質のよう素酸カリウムを用いる場合は,必要量をめのう乳鉢で軽く砕いて,
          130 ℃で約2時間乾燥した後,デシケーターに入れて放冷する。
  13.2.3) 認証標準物質1) 又は容量分析用標準物質のよう素酸カリウム0.91.1 gを全量フラスコ250 ml
          に0.1 mgの桁まではかりとり,水を加えて溶かし,水を標線まで加えて混合する。その25 ml
          を共通すり合わせ三角フラスコ200 mlに正確にはかりとり,水100 mlを加える。次に,よう
          化カリウム2 g及び硫酸(1+1)2 mlを加え,直ちに栓をして穏やかに振り混ぜて,暗所に5
          分間放置する。指示薬としてでんぷん溶液を用い,13.1)で調製した0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウ
          ム溶液で滴定する。この場合,でんぷん溶液は,終点間際で液の色がうすい黄になったときに
          約0.5 mlを加える。終点は,液の青が消える点とする。
            別に,共通すり合わせ三角フラスコ200 mlに水125 ml及びよう化カリウム2 gをはかりとり,
          硫酸(1+1)2 mlを加え,直ちに栓をして穏やかに振り混ぜて,暗所に5分間放置し,同一条
          件で空試験を行って滴定量を補正する。
  13.3) 計算 ファクターは,次の式によって算出する。
                                m  25 250        A
                         f
                            .0003 566 7V1  V2
                      ここに,           f :  0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液のファクター
                                        m :  はかりとったよう素酸カリウムの質量(g)
                                        A :  よう素酸カリウムの純度(質量分率 %)
                                       V1 :  滴定に要した0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液の体積
                                             (ml)
                                       V2 :  空試験に要した0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液の体
                                             積(ml)
                                0.003 566 7 :  0.1 mol/l チオ硫酸ナトリウム溶液1 mlに相当するよう
                                             素酸カリウムの質量を示す換算係数(g/ml)
  14) アンモニウム標準液
  14.1) アンモニウム標準液(NH4 : 1 mg/ml) 次のいずれかのものを用いる。
  14.1.1)   CSSに基づく標準液 6.3 a) 4.1.1)に準じる。

――――― [JIS K 9045 pdf 16] ―――――

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  14.1.2)   CSS以外の認証標準液など 6.3 a) 4.1.2)に準じる。
  14.1.3)   IS K 8116に規定する塩化アンモニウム2.97 gを全量フラスコ1 000 mlにとり,水を加えて溶
          かし,水を標線まで加えて混合する。
  14.2) アンモニウム標準液(NH4 : 0.01 mg/ml) アンモニウム標準液(NH4 : 1 mg/ml)10 mlを全量フ
        ラスコ1 000 mlに正確にはかりとり,水を標線まで加えて混合する。
b) 器具及び装置 主な器具及び装置は,次のとおりとする。
  1) 吸収セル 6.10 b) 1)による。
  2) 共通すり合わせ平底試験管 6.3 c)による。
  3) 沸騰石 液体を沸騰させるとき突沸を防ぐために入れる多孔質の小片。
  4) 恒温水槽 2025 ℃に調節できるもの。
  5) 蒸留装置 例を図3に示す。
  6) 分光光度計 6.10 b) 3)による。
c) 操作 操作は,次のとおり行う。
  1) 試料溶液の調製は,蒸留フラスコAに試料0.50 g及び酸化マグネシウム2 gをとり,水約140 mlを
      加える。
  2) 比較溶液の調製は,蒸留フラスコAにアンモニウム標準液(NH4 : 0.01 mg/ml)10 ml及び酸化マグ
      ネシウム2 gをとり,水約140 mlを加える。
  3) 空試験溶液の調製は,蒸留フラスコAに酸化マグネシウム2 gをとり,水約140 mlを加える。
  4) 試料溶液,比較溶液及び空試験溶液に沸騰石23粒を入れる。a) 3)で調製した吸収液の入った受器
      Hに逆流止めGの先端を浸し,蒸留装置に連結する。加熱蒸留して初留約75 mlをとり,水を加え
      て100 mlにする(試料溶液から得られた液をX液,比較溶液から得られた液をY液及び空試験溶
      液から得られた液をZ液とする。)。
  5)   液10 ml,Y液10 ml及びZ液10 mlをそれぞれ共通すり合わせ平底試験管にとり,EDTA2Na溶
      液(インドフェノール青法用)1 ml及びナトリウムフェノキシド溶液4 mlを加えてよく振り混ぜる。
      これらに次亜塩素酸ナトリウム溶液(有効塩素質量分率約1 %)2.5 mlを加え,更に水を加えて25 ml
      にし,2025 ℃の恒温水槽で15分間放置する。
  6)   液及びY液から得られた液は,Z液から得られた液を対照液とし,吸収セルを用いて,分光光度
      計で波長630 nm付近の吸収極大の波長における吸光度を,JIS K 0115の6.(特定波長における吸収
      の測定)によって測定して比較する。
d) 判定 c)によって操作し,次に適合するとき,“アンモニウム(NH4) : 質量分率0.02 %以下(規格値)”
    とする。
      X液から得られた液の吸光度は,Y液から得られた液の吸光度より大きくない。

――――― [JIS K 9045 pdf 17] ―――――

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                                                                            単位 mm
                                                 A :   蒸留フラスコ500 ml
                                                 B :   連結導入管
                                                 C :   すり合わせコックK-16
                                                 D :   注入漏斗
                                                 E :   ケルダール形トラップ球(E' : 小孔)
                                                 F :   球管冷却器300 mm
                                                 G :   逆流止め(約50 ml)
                                                 H :   受器(有栓形メスシリンダー100 ml)
                                                  I :  共通すり合わせ
                                                  J :  共通テーパー球面すり合わせ
                                                 K :   押さえばね
                                                 L :   ヒーター
                                       図3−蒸留装置の例

6.13 他のアミノ酸

  他のアミノ酸の試験方法は,次による。
a) 試験用溶液類 試薬及び試験用溶液類は,次のものを用いる。
  1) 塩酸(1+10) 6.3 a) 1)による。
  2) ニンヒドリン・アセトン溶液(発色液) JIS K 8870に規定するニンヒドリン2 gをJIS K 8034に
      規定するアセトンに溶かして,アセトンで100 mlにする。
b) 器具及び装置 主な器具及び装置は,次のとおりとする。
  1) 薄層板 50200 mm×200 mmの平滑で均一な厚さのガラス板に,固定相基材を0.20.3 mmの均
      一な厚さに塗布したもの。
        なお,薄層板は,市販の既製品も使用することができる。
  2) 展開容器 例を図4に示す。
  3) マイクロシリンジ又はマイクロピペットなど 少量の定容量の溶液をはかりとる体積計。
  4) ろ紙 JIS P 3801に規定するもの。
  5) 乾燥器 試験温度に対して±2 ℃以内に調節できるもの。

――――― [JIS K 9045 pdf 18] ―――――

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                                       図4−展開容器の例
c) 分析条件
  1) 固定相基材の種類 薄層クロマトグラフ用シリカゲル
  2) 展開溶媒 JIS K 8810に規定する1-ブタノール120 ml,水60 ml及びJIS K 8355に規定する酢酸60
      mlを混合する。
  3) 展開距離 約10 cm
d) 操作 操作は,次のとおり行う。
  1) 試料溶液の調製は,試料0.20 gを全量フラスコ50 mlにとり,塩酸(1+10)を加えて溶かし,塩酸
      (1+10)を標線まで加えて混合する。
  2) 薄層板の下端から約20 mm上の位置を原線とし,原線上の左右両端から少なくとも10 mm離れた
      位置に試料溶液0.005 ml(試料量20 μg)をマイクロシリンジ,マイクロピペットなどを用いて10 mm
      以上の間隔で26 mmの円形状にスポットし,乾燥する。
  3) 展開容器の内壁に沿ってろ紙を巻き,ろ紙を展開溶媒で湿し,更に展開溶媒を約10 mmの深さに入
      れ,展開容器を密閉した後,室温で約1時間放置して展開溶媒の蒸気を飽和させる。
  4) これに薄層板を器壁に触れないように入れ,容器を密閉し,室温で放置して展開させる。
  5) 展開溶媒の先端が原線から約10 cmの距離まで上昇したとき,薄層板を取り出し,直ちに溶媒の先
      端の位置に印を付けて風乾後,100 ℃で30分間乾燥し,放冷する。これに発色液を噴霧し,80 ℃
      で10分間加熱して発色させ,スポットの位置,数などを調べる。
e) 判定 d)によって操作し,次に適合するとき,“他のアミノ酸 : 試験適合”とする。
      発色液を噴霧した薄層板は,主スポット以外のスポットを認めない。
    注記 移動率(Rf)を求める場合は,次の式によって算出する。
                         Rf  a
                             b
                      ここに,         Rf :  移動率
                                        a :  原線からスポットの中心までの距離(mm)
                                        b :  原線から溶媒先端までの距離(mm)
            なお,L-アスパラギン酸のRf値は,約0.4である。

7 容器

  容器は,気密容器とする。

――――― [JIS K 9045 pdf 19] ―――――

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8 表示

  容器には,次の事項を表示する。
a) 日本工業規格(日本産業規格)番号
b) 名称 “L-アスパラギン酸”及び“試薬”の文字
c) 種類
d) 化学式及び式量
e) 純度
f)  内容量
g) 製造番号
h) 製造業者名又はその略号