JIS K 8470:2016 Ｌ－システイン塩酸塩一水和物（試薬） | ページ 4

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      を加えて溶かし,水を標線まで加えて混合する。この液4.0 mLを全量フラスコ500 mLにとり,1
      mol/L硫酸5.0 mLを加え,水を標線まで加え,トリトン溶液1 mLを加え混合する。保管する場合
      には,冷蔵とする。
  6) ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル溶液(トリトン溶液という。) ポリオキシエチレン
      オクチルフェニルエーテル[トリトン(X−100)]30 mLに水70 mLを加え,よくかき混ぜる。
  7) 1 mol/L硫酸(H2SO4 : 98.08 g/L) 水1 000 mLをビーカーにとり,JIS K 8951に規定する硫酸60 mL
      をかき混ぜながら徐々に加えて放冷した後,気密容器に入れて保存する。
  8) アンモニウム標準液(NH4 : 0.01 mg/mL) 6.11.1 a) 10)による。
b) 装置 主な装置は,次のとおりとする。
      連続流れ分析装置 装置の構成は,JIS K 0126に規定する分光光度計及び透析分離機能を備えたも
    の。装置の構成の例を図4に示す。
                   送液部
                                       反応部           検出部        指示・記録部
             (試料・試薬導入部)
                      送気部
                                 図4−連続流れ分析装置の構成例
c) 操作 操作は,次のとおり行う。
  1) 試料溶液の調製は,試料0.1 gを全量フラスコ100 mLにはかりとり,水を加えて溶かし,水を標線
      まで加えて混合する。
  2) 検量線溶液の調製は,3個の全量フラスコ100 mLのそれぞれにアンモニウム標準液(NH4 : 0.01
      mg/mL)0.5 mL,1.0 mL,5.0 mLをとり,水を標線まで加えて混合する(それぞれ,Y1液,Y2液及
      びY3液とする。)。
  3) 空試験溶液は,試料溶液の希釈に用いた水とする。
  4) 分析装置及び検出器を作動できる状態にし,水及び試薬溶液をポンプで送液し,分析に支障を来さ
      ない状態になるまで待つ。この間,流れの気泡の間隔が乱れていないことを確認する。
  5) 試料溶液,空試験溶液,Y1液,Y2液及びY3液を波長630 nmにおける吸光度を測定する。
d) 計算 JIS K 0126の6.1.2(連続流れ分析)によって検量線を作成し,アンモニウム(NH4)の含有率
    を計算する。
e) 判定 c)によって操作し,d)によって計算し,次に適合するとき,“アンモニウム(NH4) : 質量分率
    0.05 %以下(規格値)”とする。
      計算して得られた含有率が,規格値を満足している。

6.12 他のアミノ酸

  他のアミノ酸の試験方法は,次による。
a) 試薬及び試験用溶液類 試薬及び試験用溶液類は,次のものを用いる。
  1) 塩酸(1 mol/L) 6.4 a)による。
  2)   (-)-シスチン JIS K 9048に規定するもの。
  3)   -エチルマレイミド溶液 N-エチルマレイミド(純度 質量分率97.0 %以上のもの)2 gを水に溶か

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      し,水で100 mLにする。
  4) ニンヒドリン・アセトン溶液(発色液) JIS K 8870に規定するニンヒドリン2 gをJIS K 8034に規
      定するアセトンに溶かし,アセトンで100 mLにする。
b) 器具及び装置 主な器具及び装置は,次のとおりとする。
  1) 薄層板 (50 mm200 mm)×200 mmの平滑で均一な厚さのガラス板に,固定相基材を0.2 mm0.3
      mmの均一な厚さに塗布したもの。
        注記 薄層板は,市販の既製品も使用することができる。
  2) 展開容器 例を図5に示す。
  3) マイクロシリンジなど 少量の定容量の測定溶液をはかりとる体積計。
  4) ピストン式ピペット JIS K 0970に規定するもの。
  5) ろ紙 JIS P 3801に規定するもの。
  6) 乾燥器 試験温度に対して±2 ℃以内に調節できるもの。
                                       図5−展開容器の例
c) 分析条件
  1) 固定相基材の種類 薄層クロマトグラフ用シリカゲル
  2) 展開溶媒 JIS K 8810に規定する1-ブタノール100 mL,水50 mL及びJIS K 8355に規定する酢酸
      50 mLを混合する。
  3) 展開距離 約10 cm
d) 操作 操作は,次のとおり行う。
  1) 試料溶液の調製は,試料0.50 gを全量フラスコ50 mLにはかりとり,N-エチルマレイミド溶液を加
      えて溶かし,N-エチルマレイミド溶液を標線まで加えて混合し,2時間放置する。
  2) 対照液の調製は,L(-)-シスチン0.50 gを全量フラスコ100 mLにはかりとり,塩酸(1 mol/L)を加
      えて溶かし,塩酸(1 mol/L)を標線まで加えて混合する。その液1 mLを全量フラスコ50 mLに正
      確にとり,N-エチルマレイミド溶液を標線まで加えて混合する。
  3) 薄層板の下端から約20 mm上の位置を原線とし,原線上の左右両端から少なくとも10 mm離れた
      位置に試料溶液0.005 mL(試料量50 μg)及び対照液0.005 mL[L(-)-シスチン量0.5 μg]をマイク
      ロシリンジ,ピストン式ピペットなどを用いて10 mm以上の間隔で2 mm6 mmの円形状にスポッ
      トし,乾燥する。
  4) 展開容器の内壁に沿ってろ紙を巻き,ろ紙を展開溶媒で湿し,更に展開溶媒を約10 mmの深さに入
      れ,展開容器を密閉した後,室温で約1時間放置して展開溶媒の蒸気を飽和させる。

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  5) これに薄層板を器壁に触れないように入れ,容器を密閉し,室温で放置して展開させる。
  6) 展開溶媒の先端が原線から約10 cmの距離まで上昇したとき,薄層板を取り出し,直ちに溶媒の先
      端の位置に印を付けて風乾後,100 ℃で30分間乾燥し,放冷する。これに発色液を噴霧し,80 ℃
      で10分間加熱して発色させ,スポットの位置,数などを調べる。
e) 判定 d) によって操作し,次に適合するとき,“他のアミノ酸 : 試験適合”とする。
      発色液を噴霧した薄層板は,主スポット以外のスポットは,対照液から得られるスポットより濃く
    ない[L(-)-シスチンとして質量分率1.0 %以下]。
      注記 移動率(Rf)を求める場合は,次の式によって算出する。
                         Rf  a
                             b
                      ここに,    Rf :  移動率
                                   a :  原線からスポットの中心までの距離(mm)
                                   b :  原線から溶媒先端までの距離(mm)
              なお,L-システイン塩酸塩一水和物のRf値は,約0.6,L(-)-シスチンのRf値は,約0.3であ
            る。

7 容器

  容器は,気密容器とする。

8 表示

  容器には,次の事項を表示する。
a) 日本工業規格(日本産業規格)番号
b) 名称“L-システイン塩酸塩一水和物”及び“試薬”の文字
c) 種類
d) 化学式及び式量
e) 純度
f)  内容量
g) 製造番号
h) 製造業者名又はその略号